高压蒸汽灭菌器是医疗安全的一个重要环节，也是控制传染性疾病蔓延的一个关键措施，脉动真空蒸汽灭菌器是目前医院应用普遍而有效的医疗器械灭菌方法，该实验室仪器的工作原理是通过多次对灭菌室抽取真空和充入蒸汽，使灭菌室达到一定的真空度后，让灭菌器内部无残留的空气，再充入饱和蒸汽，达到设定压力和温度，利用蒸汽在凝结成水的过程中释放的潜热杀灭细菌，实现对被灭菌物进行灭菌的目的。
高压蒸汽灭菌器对冷空气排出比较*，一般脉动三次，每次脉动-80Kpa以下，从而使灭菌室内排出冷空气达到99%以上，灭菌室内温度一致性高，内室抽空，夹层保持一定压力温度，还能使灭菌物品干燥，避免二次感染。
高压蒸汽灭菌器灭菌程序运行过程如下： 脉动——升温——灭菌——排汽——干燥——结束。
1、脉动：对灭菌器内室进行抽真空、进蒸汽操作，反复进行三次，然后再次抽真空，待内室压力到达脉动下限后，程序转入升温阶段。经过该阶段后，内室的冷空气排除率可达到99%以上，确保内室无死点，保证灭菌的合格。
2、升温：蒸汽经过灭菌器夹层进入内室，对器械进行加热，同时内室疏水阀间歇性开启，将蒸汽冷凝后产生的水排出。内室温度达到设定值后程序转入灭菌阶段。
3、灭菌：开始灭菌计时，在此期间内室进汽阀受到内室温度和压力的共同控制以确保内室保持在一定的温度范围内对器械进行灭菌。当内室温度高于灭菌器设定的数值上*，进汽阀关闭，低于数值下*，进汽阀打开；同时，当内室压力高于数值上*，进汽阀也会关闭，低于内室压力下限值时，进汽阀打开以确保灭菌阶段温度的上下波动不超过3°。灭菌计时结束后，程序转入排汽阶段。
4、排汽：排汽阀打开，内室的蒸汽在内外压差的作用下排出，经过换热器的作用，大部分蒸汽冷凝成水，少部分蒸汽经过滤后排至大气。内室压力下降到设定值后，程序转入干燥阶段。
5、干燥：真空泵打开对内室进行抽真空，同时夹层保持一定的压力和温度，起到烘干器械的作用。
6、结束：蜂鸣器呼叫，此时可以打开门将灭菌车推出进行器械的晾放。
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